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Affimer
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Ein Affimer ist ein kΓΌnstlich erzeugtes Protein aus der Gruppe der Cystatine, das eine bestimmte AminosΓ€uresequenz auf der OberflΓ€che besitzt.cite-ref-pmid-16139842-1-0[1] Affimere sind eine Form der Peptid-Aptamere.

Contents

β€’ Anwendung
β€’ Literatur

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Eigenschaften

Affimere basieren auf dem Proteaseinhibitor Cystatin A, nur werden im Zuge eines Proteindesigns einige AminosΓ€uren an einer Stelle der MolekΓΌloberflΓ€che ausgetauscht. Dadurch kann das erzeugte Affimer an MolekΓΌle binden, die an die eingefΓΌgte Sequenz binden. Der Cystatin-Anteil dient dabei als GerΓΌst zur Stabilisierung der Konformation der eingefΓΌgten Sequenz, z. B. einer Ξ±-Helix. Cystatine besitzen eine vergleichsweise hohe biologische Halbwertszeit und ThermostabilitΓ€t. In ein Affimer kΓΆnnen zwischen 12 und 36 AminosΓ€uren mit einer KontaktflΓ€che von 650 to 1000 Γ…2 eingefΓΌgt werden.cite-ref-pmid-16139842-1-1[1]

Basierend auf pflanzlichen Cystatinen wurden analog zu den Affimeren die Adhirons entwickelt.cite-ref-2[2]

Anwendung

Affimere werden unter anderem zur Proteincharakterisierung und in Immunassays eingesetzt.cite-ref-3[3]

Literatur

β€’ A. Skerra: Alternative non-antibody scaffolds for molecular recognition. In: Current Opinion in Biotechnology. Band 18, Nummer 4, August 2007, S. 295–304, ISSN 0958-1669. doi:10.1016/j.copbio.2007.04.010. PMID 17643280.
β€’ M. Gebauer, A. Skerra: Engineered protein scaffolds as next-generation antibody therapeutics. In: Current opinion in chemical biology. Band 13, Nummer 3, Juni 2009, S. 245–255, ISSN 1879-0402. doi:10.1016/j.cbpa.2009.04.627. PMID 19501012.

Einzelnachweise

cite-note-pmid-16139842-11. ↑ R. Woodman, J. T. Yeh, S. Laurenson, P. Ko Ferrigno: Design and validation of a neutral protein scaffold for the presentation of peptide aptamers. In: Journal of molecular biology. Band 352, Nummer 5, Oktober 2005, S. 1118–1133, ISSN 0022-2836. doi:10.1016/j.jmb.2005.08.001. PMID 16139842.
cite-note-22. ↑ C. Tiede, A. A. Tang, S. E. Deacon, U. Mandal, J. E. Nettleship, R. L. Owen, S. E. George, D. J. Harrison, R. J. Owens, D. C. Tomlinson, M. J. McPherson: Adhiron: a stable and versatile peptide display scaffold for molecular recognition applications. In: Protein engineering, design & selection : PEDS. Band 27, Nummer 5, Mai 2014, S. 145–155, ISSN 1741-0134. doi:10.1093/protein/gzu007. PMID 24668773. PMC 4000234 (freier Volltext).
cite-note-33. ↑ A. Johnson, Q. Song, P. Ko Ferrigno, P. R. Bueno, J. J. Davis: Sensitive affimer and antibody based impedimetric label-free assays for C-reactive protein. In: Analytical chemistry. Band 84, Nummer 15, August 2012, S. 6553–6560, ISSN 1520-6882. doi:10.1021/ac300835b. PMID 22789061.